Virüs izolasyonu

Tahmini okuma süresi: < 1 dakika

Sinonim: Virusisolierung (VIS), virus isolation

  • Virüsler zorunlu hücre içi parazitidirler, çoğalmaları konakların enzim donanımını kullanmalarına bağlıdır.
  • Virüsün izolesi için deney havyanı, yumurta kültürü(bu ikisi günümüzde nadir kullanılan yöntemlerdir) veya hücre kültürü gereklidir.
  • Hücre kültüründeki hücre hatları şunlardır.
    • Primer hücre hatları: organizmadan alınan taze dokudan oluşur, çoğalamaz.
    • Sınırlı hücre hatları: Sınırlı bölünme yeteneği olan, ör: insan akciğeri v.s.
    • Sınırsız hücre hatları: Çoğunlukla tümör dokularından oluşur.Ölümsüz hücrelerdir.Ör: HeLA hattı(Boyun kanseri hücreleri), HEP-2-hücreleri(Farinks kanseri hücreleri)
  • Virüs izolasyonu için steril koşullar altında(Laminar flow cabinet) çalışılmalıdır.
  • Hücre hatları tek tabaka kültürü olarak büyür. Hücre hatlarının büyümesi ve devamlılığı için özgül kültür Mediumları gereklidir;
    • Tampon tuz çözeltisi
    • Aminoasitler (essensiyel ve essensiyel olmayan)
    • Glukoz,
    • Vitamin,
    • pH belirteci
    • Antibiyotik
  • Virüsün ve hücrenin tipine göre bir enfeksiyon meydana gelirek sitopatik etki oluşur. Bu etkiyi ışık mikroskobunda hücrelerin değişiminden tespit edilebilir.
  • incelenecek örnek (İdrar, dışkı, beyin sıvısı, kan v.b. ) hücre hattına getirilir ve kuluçkaya bırakılır.
  • Aşılanmış kültür sonraki günlerde ışık mikroskobuyla incelenerek morfolojik değişiklikler kontrol edilir. Sitopatik etkinin ortaya çıkması 1-2 hafta sürebilir.
Facebook Yorumları