İmmünfloresan testi

Sinonim: İmmünfloresan yöntemi, Immunofluorescence, Immunfluoreszenz (IF)

  • immünglobinlerin kimyasal olarak belirli boyalarla(Ör: flöresan izotiyosiyanat (FITC, mavi), tetrametil rodamin izotiyosiyanat (TRITC, yeşil)) antijene bağlanma yeteneğini kaybetmeden boyanmasıdır.
  • Flurokrom adı verilen madde görünür ışığa
    floresan mikroskobu

    maruz bırakıldığında, ışığı farklı dalga
    boyunda geri yansıtır. Geri yansıtılan ışık bu yüzden farklı renkte olur.

  • Mikroskopta gözlemleyebilmek için, mikroskop lamında antijeni barındıran hücresel elementler, Flurokrom işaretli antikorlar gereklidir. Bunun dışında renkli ışıldayan objektifi veya karanlık arka planlı floresan mikroskobu gereklidir.
  • Eğer antijen-antikor reaksiyonu gerçekleşmezse fazla olan işaretleyici antiserum yıkanmalıdır.
  • İmmünfloresan tekniği farklı şekillerde uygulanabilir:
1)Direk immünfloresan testi

İncelenmek istenen antijen ve ona özgül olan, homolog, Flurokromlu antikor lama konulur. Ardından antikor ile antijen reaksiyonu oluşur. Eğer oluşmazsa antijene bağlanmayan anitkorlar yıkanır. Son olarak elde edilen görüntü değerlendirilir.

2)Dolaylı immünfloresan testi

İncelenmek istenen antijen ve bu antijene özgül antikor lama konulur. Antikor-antijen bağlanmaı gerçekleşir. Ardından homolog, flurokromlu anti-antikorlar yerleştirilir. Bağlı olmayan antikorlar yıkanır ve görüntü değerlendirilir.


  • Rutin muayene için genellikle dolaylı immünfloresan yöntemi kullanılır. Çünkü bu yöntem daha hassastır. Bir konjugat birçok antiserum için kullanılabildiği için daha ucuz bir yöntemdir.
  • IFT klinik materyaldeki viral antijenleri tespit etmekte kullanılır. (ÖR: bronş lavajında veya burun sekresyonunda Respiratuvar sinsitiyal virüs (RSV) tespiti)
  • Hücre kültürdünde virüs tiplerini tespit etmekte kullanılır.
  • Doku kültür hücrelerindeki önceki virüslerin sebep oldukları antijenleri tespit ederken kullanılır. ışık mikroskobunda sitopatik etkinin 2 haftada gözlemlenirken, bu yöntemle sonuca 16 saat içinde varılabilir.(ÖR: idrarda sitomegalovirus tespiti)

 

Facebook Yorumları